Genistein抑制人卵巢癌细胞系SKOV3增殖和诱导凋亡发生的研究

李昱米粲

重庆医科大学病理学教研室重庆医科大学病理学教研室重庆400016

背景与目的:许多研究表明 Genistein对多种肿瘤细胞有抑制作用,但有关 Genistein
对卵巢癌细胞作用的报道很少.本研究旨在通过观测 Genistein对人卵巢癌细胞系
SKOV3的抑制增殖和诱导凋亡作用,探讨其抗癌作用的机理.方法:应用四甲基偶氮
唑盐( MTT)法检测不同浓度 Genistein对 SKOV3的生长抑制作用;吖啶橙 /溴乙锭
( AO/EB)荧光染色法及电镜观察凋亡细胞及凋亡小体;流式细胞仪分析细胞周期及
凋亡率;琼脂糖凝胶电泳检测凋亡特征性 DNA梯形带;免疫细胞化学法及 RT- PCR
法分别检测细胞增殖凋亡调控相关蛋白及其 mRNA的表达。结果： Genistein对
SKOV3细胞的增殖抑制作用呈时间及浓度依赖性， 20 μ mol/L和 40 μ mol/L
Genistein作用 72 h后，细胞的生长抑制率达 72. 07％和 74. 93％。 20 μ mol/L
Genistein作用 SKOV3细胞 48 h后出现细胞周期的 G2/M期阻滞。荧光显微镜和
电镜均观察到用药后凋亡细胞典型的形态学特征。细胞凋亡率以 Genistein 20
μ mol/L组最高，达 23. 7％。凝胶电泳观察到特征性 DNA梯形带。 20 μ mol/L
Genistein作用 SKOV3 48 h后， bcl- 2基因表达水平降低，而 p21WAF1/CIP1
和 bax基因表达增加（ P< 0. 05）； PCNA、Bcl- 2及 cyclin B1蛋白表达水平
降低， Bax、p21WAF1/CIP1蛋白表达增加（ P< 0. 01）。结论： Genistein
可抑制卵巢癌细胞系 SKOV3的增殖并诱导其发生凋亡， Genistein可能通过
上调 p21WAF1/CIP1基因及蛋白水平、下调 cyclin B1及 PCNA蛋白表达水平
抑制增殖；通过下调 bcl- 2基因及蛋白表达、上调 bax基因及蛋白表达诱导卵
巢癌细胞凋亡.

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